Eine einfache Schnittechnik zur schnellen Bestimmung von Torfmoosen

Zum Bestimmen von Torfmoosen (Spaghnum) sind Querschnitte von Astblättern, gelegentlich auch von Stämmchen, erforderlich. In den Astblättern ist die Form und Lage der chlorophyllhaltigen Zellen (Chlorocyten) zu ermitteln. Die Blätter sind – wie bei den meisten Moosen – einzellschichtig und haben eine Dicke von ca. 30-40 µm. Die Schnitte müssen also dünner als diese ca. 40  µm sein, damit der Schnitt möglichst nicht auf der falschen Seite zu liegen kommt.

Da nicht der Schnitt das Ziel der Arbeit ist sondern die Bestimmung der Art, verbieten sich langwierige Einbettungen. Die klassische Schneidemethode ist die mit Holundermark, die aber sehr viel Geschick erfordert. Man kann auch die Blätter oder Stämmchen in einen Tropfen Wasser auf den Objektträger legen, mit einer Nadel festhalten und unter dem Binokular mit einer Rasierklinge Schnitte führen. Oder auch einen Fingernagel zum Ansetzen der Klinge nehmen. Auch das erfordert viel Erfahrung und Geschick. Eine Alternative ist die Einbettung in Histowachs.

Histowachs ist der deutsche Handelsname für Polyethylenglykol, welches Paraffin-artig ist, aber wasserlöslich. Es wird mit unterschiedlichen Schmelzpunkten zwischen 44° und 58° von der Fa. Chroma (jetzt Waldeck) vertrieben. Es wird in der Regel auch wie Paraffin benutzt (vgl. die Anleitung im Aufsatz "Ausgewählte Färbemethoden" von Chroma [1])

Dies ist für die Einbettung ähnlich umständlich und zeitraubend wie die Paraffin-Methode, hat aber den Vorteil, dass man die Schnitte zum Schluss in Wasser auswaschen kann. Eine einfachere Methode hat Felix Schumm für Flechten entwickelt. Sinngemäß lässt sich diese Methode auch für Torfmoose benutzen: man nimmt dann statt des Flechtentallus ein Torfmoosästchen zum Einbetten oder streift besser einzelne Blätter auf einen Objektträger, weil die Blätter am Ast schräg inseriert sind und das zu Schrägschnitten führen kann.


Eine Messerspitze Histowachs wird auf einen Objektträger gegeben und mit einem Feuerzeug zum Schmelzen gebracht. In das noch flüssige Histowachs drückt man ein ca 4 mm langes trockenes (!!) Thallusstückchen der zu schneidenden Flechte und wartet, bis das Wachs erkaltet ist. (Um das Abkühlen zu beschleunigen, kann man den Objektträger auf den Objekttisch des Mikroskops legen, wodurch die Wärme rasch abgeleitet wird). Dann schneidet man mit einer ggf. halbierten Rasierklinge, am besten unter dem Binokular, dünnste Scheibchen ab. Die Schnitte werden mit dem Skalpell oder ähnlichem direkt auf einen anderen Objektträger in einen Tropfen Wasser übertragen. Das Histowachs löst sich in Wasser auf, und man kann die Schnitte nach Auflegen eines Deckgläschens sofort untersuchen. [2]

Um langwieriges Entwässern zu vermeiden, verwendet man am besten ein wasserlösliches Einschlussmedium. Früher wurde die flache Aufbewahrung in Glyzerin, Einbettung in Glyceringelatine, Hoyers Medium o.ä. empfohlen. Heute gibt es eine Vielzahl von wasserlöslichen Produkten (Merck Aquatex, Microtech Hydromatrix u.a.).
Da – wie erwähnt – Schnitte eine Umbettung schlecht vertragen, kann man das Einschlussmedium unter dem Deckglas hindurch ziehen. Dazu gibt man mit einer kleinen 25 ml Spritzflasche an einem Rande des Deckglases einen Streifen des Einschlussmediums. Der Streifen muss der Kante des Deckglases anliegen, darf aber nicht auf die Oberfläche kommen. Wenn das Wasser im Präparat nun zu den drei offenen Seiten verdunstet, wird das Einschlussmedium nachgesogen. Die richtige Menge muss man in eigener Erfahrung ausprobieren: ist es zu wenig, wandert es nicht ganz durch das Präparat.

Durch die hier beschriebene Methode verkürzt sich das Einbetten auf wenige Sekunden. Man braucht keinerlei Vorbereitungen und kann jederzeit entscheiden, ob man das Präparat verwirft oder durch einen Streifen Einschlussmittel konserviert. Der Objektträger muss dann einige Tage flach aufbewahrt werden um auszuhärten, bevor er beschriftet und aufrecht gestellt werden kann.