W3Asim II - umgekippt

Je nach dem in welchem Verhältnis und Konzentration die Einzelfarben Acridinrot, Acriflavin und Alcianblau zu einer Farblösung gemischt werden, fällt die Farbwirkung verschieden aus. Besonderen Einfluss hat das Acriflavin, das zuviel beigemischt insgesamt „schmutzig“-gelb bis ocker färbt, im richtigen Verhältnis aber zusammen mit dem Alcianblau spezifisch grün bis blau anfärbt. Natürlich kann die Färbung abhängig von der verwendeten Probe verschieden ausfallen. Aber wenn man Stammlösungen vorhält, lässt sich die Färbung gut anpassen.

Für die nachstehende Färbung wurden ca. 10 mm lange Zweigstücke von der Gewöhnlichen Robinie (Robinia pseudoacacia) für 3 Tage in AFE (Fixiergemisch aus Ethanol-Formol-Eisessig) fixiert und danach zur Aufbewahrung in 70% Ethanol überführt.

Von einem der fixierten Zweigstücke wurden dann Querschnitte mit einem Schlittenmikrotom mit extrem schräg gestelltem C-Messer gemacht. Die Schnitte werden bis zur weiteren Verarbeitung in 70% Ethanol aufbewahrt. Mit diesem Vorrat ist es möglich, mit unterschiedlichen Farbstoffansätzen nach der im Folgenden beschriebenen Methode Dauerpräparate zu erstellen.

So werden zum Beispiel drei Schnitte entnommen und beginnend mit 70% Ethanol über Alkoholstufen abnehmender Konzentration in destilliertes Wasser überführt. Dieses dann noch mindestens drei mal wechseln, um den Alkohol sicher zu entfernen.

Anschließend kommen die Schnitte für 12 Minuten in die Farblösung, wobei anfangs kurz auf ca. 60° Celsius erwärmt wird.
Die gefärbten Schnitte werden als nächstes in destilliertem Wasser gewaschen, das mehrmals gewechselt wird bis keine Farbe mehr abgeht.
Die gefärbten und gewaschenen Schnitte kommen danach in 70% Ethanol, was ebenfalls mehrmals gewechselt wird, bis keine Farbe mehr abgeht.
Zum vollständigen Entwässern werden die jetzt ausgefärbten Schnitte aus 70% Ethanol in 100% Isopropylalkohol überführt. Der Isopropylalkohol wird auch hier mehrmals gewechselt (mindestens 3x).
Abschließend können die Schnitte in Euparal eingeschlossen werden.

Es lohnt sich somit schon, die Einzelfarben in Stammlösungen vor zuhalten und daraus jeweils nach Anforderung die Färbelösung zusammenzusetzen. Bei der W3Asim II-Färbung kann Konzentration und Anteil von Acridinrot und Alcianblau bestehen bleiben. Ausgehend vom 1%igen Acriflavin (hier Farbwirkung grün) kann die Konzentration aber bis auf 0,2% verdünnt werden (hier Farbwirkung blau). auch Zwischentöne sind möglich, siehe das letzte Bild.