1. Bornheimer Fluoreszenz Café
Zwiebelzellen unterm Mikroskop.Bonn, den 02.12.2017
Kaffee und Kuchen waren der Auftakt das 1. Born- heimer Fluoreszenz Café, welches heuer zum ersten Mal stattfand. Im privaten Rahmen lud Thilo Bauer zum Erfahrungstausch in der Fluoreszenz-Mikroskopie ein. Auftakt bildete der Vortrag von Horst Wörmann der die physikalischen und technischen Grundlagen der Fluoreszenz detailliert erläuterte. In der anschließenden Einführung in die Fluoreszenz Mikroskopie brachte Thilo Bauer den Teilnehmern die Methode der Fluorochromierung von Zellen mit Acridinorange nahe. Hierbei lernten die Teilnehmer ausgehend vom Ansatz der Stammlösung selbständig ihre erste Färbelösung anzusetzen. Wichtig ist hierbei die Verdünnung des Fluorochroms mit Kulturmedium, um Zellstress zu reduzieren. Am klassischen Modellorganismus der Biologen, dem Zwiebelhäutchen, erlebten die Teilnehmer die Schwierigkeiten das Fluorochrom zur Kernfärbung in die Zellen einzubringen.
Färbung der Zellkerne der Zwiebelhaut mit improvisierter Fluoreszenzbeleuchtung an einem Zeiss Standard Junior.
Eine gut gehende Kultur von Paramecium aurelia diente als Anschau- ungsmaterial, um die spezifische rote Färbung von sauren Organellen der Wimpertiere zu studieren. Eine Eigenschaft des Acridinorange ist seine Metachromasie, welche Färbungen in einem bunten Farbspektrum von Grün über Gelb, Orange bis Rot bietet. Vermutlich ist die Metachromasie begründet auf unterschiedlichem pH und verschiedener Konzentration des basischen Farbstioffs in sauren Organellen. Die Färbung ermöglicht differenzierte Darstellung verschiedener Zellorganellen, wie Zellkern und Nahrungsvakuolen und den Acidosomen von Paramecium, welche wohl Verdauungssekrete in die Nahrungsvakuolen befördern. Die Erklärung der Phänomene wurde in verschiedenen Publikationen versucht, ist jedoch bis heute weitgehend unverstanden. Daher bietet Acridinorange noch viel Spielraum für den Forscherdrang des Amateurs, um seine Färbungen zu erklären. Anhand der Untersuchung ungefärbter Präparate traten die Wimpertiere zuletzt noch den Gegenbeweis an: Die zu beobachtende Rotfärbung der Organellen ist nicht auf Autofluoreszenz des Chlorophyll von Grünalgen zurückzuführen, welche eventuell gefressen wurden. In der Kultur waren nach einer Woche Aufenthalt im Dunkeln im Präparat keine Algen mehr nachweisbar. Ohne Färbung mit Acridinorange blieben die Präparate dunkel.
Euplotes spec. in Fluoreszenz mit Acridinorange: Bestimmte Organellen entlang der Cilienreihen färben mit Acridinorange in den Farben Gelb bis Rot. Solche Färbungen sind charakteristisch für verschiedene Arten der Ciliata (Wimpertiere). Aufnahme: Thilo Bauer.
Imkpressionen vom Fluoreszenz Café
| Text: |
Thilo Bauer |
| Bilder: | Thilo Bauer |
